辣根过氧化物酶，Peroxidase from horseradish [POD, HRP]；Type VI-A, essentially salt-free, lyophilized powder, 950-2000 units/mg solid (using ABTS), ≥250 units/mg solid (using pyrogallol)

别名：过氧化物酶来源于辣根；供体：过氧化氢氧化还原酶；辣根酶；Donor:hydrogen-peroxide oxidoreductase；Horseradish peroxidase；Peroxidase from horseradish

CAS号: 9003-99-0 EC 号: 1.11.1.7 (BRENDA, IUBMB) EC 号: 232-668-6 MDL编号: MFCD00071339 eCl@ss: 32160410 NACRES: NA.54

制造商品牌: 西格玛 Sigma-Aldrich

货号（SKU）: P6782

CAS号: 9003-99-0

MDL号: MFCD00071339

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说明

一般描述

辣根过氧化物酶是从辣根（Amoracia rusticana）中分离出来的，属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成，具体取决于特定同工酶。其分子量（约44 kDa）包括多肽链（33,890道尔顿）、氯化血红素加Ca²⁺ （约700道尔顿）和碳水化合物（约9,400道尔顿）。至少存在7种HRP同工酶。辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。

应用

Sigma的酶已被用于开发快速、灵敏且具有长期稳定性的半乳糖氧化酶-过氧化物酶生物传感器，以便检测半乳糖。[1]它已被用作含有3,3′,5,5′-四甲基联苯胺（TMB）的培养基（MRS琼脂板）的组分，用于乳酸菌的生长。TMB是过氧化物酶的显色底物。过氧化物酶将乳酸菌产生的H₂O₂ 催化分解为O₂，并且TMB在O₂存在下将菌落染成蓝色。因此，在含5% CO₂的空气环境下孵育48小时后，MRS琼脂上产生H₂O₂ 的菌落呈深蓝色。不产生H₂O₂ 的菌落仍为无色。[2]它已被用于研究聚乙烯醇对辣根过氧化物酶的稳定作用。[3]它还被用于测定溶液中的葡萄糖[4] 和过氧化物[5] 。

辣根过氧化物酶（HRP）分离自辣根中（Amoracia rusticana）。它可用于生物化学应用，如蛋白质印迹、ELISA和免疫组织化学。辣根过氧化物酶可用于扩增弱信号并增加靶分子（例如蛋白质）的可检测性。产品P6782是VI-A型，本质上是一种无盐冻干粉。它被用于定量胆固醇和胆固醇酯[6]，并用于研究水凝胶和硅水凝胶隐形眼镜的体外脂质沉积[7]。

生化/生理作用

HRP容易与过氧化氢（H₂O₂）结合，生成的[HRP-H₂O₂]配合物可以氧化多种氢供体。该酶的最适pH为6.0-6.5，在5.0-9.0的pH范围内最稳定。HRP可以通过几种不同的方法与抗体结合，包括使用戊二醛、高碘酸盐氧化、二硫键以及氨基和巯基定向交联剂。它比酶标记物β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定。因此，它是最理想的标记物。同时，其糖基化会产生较低的非特异性结合。[8]已有研究发现叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸以及 Cd²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺、Mn²⁺、Ni²⁺和Pb²⁺离子可抑制该酶活性。[9]

辣根过氧化物酶与底物一起孵育时，产生一种有色、荧光或发光的标记分子衍生物，以便可以定量。辣根过氧化物酶已被证明能抑制cydAB突变,使其突变水平稍微降低。

联系

与P8375相似

单位定义

一个ABTS单元将在25°C、pH 5.0条件下每分钟氧化1 μM的ABTS

一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下，在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。

制备说明

本品以1 mg/mL的浓度溶于0.1 M磷酸盐缓冲液（pH 6.0）中，可在室温下保持活性至少两周。该溶液在5次冻融循环后仍保留活性。

分析说明

RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A₄₀₃/A₂₇₅ 。它是血红素含量的量度，而不是酶活性。即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。

本品使用ABTS测定，以便与其他供应商的单位进行比较：每mg固体约1,000单位

其他说明

有关过氧化物酶的更多信息，请访问 www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer。

属性

类型

Type VI-A

质量水平

300

形式

essentially salt-free, lyophilized powder

specific activity

≥250 units/mg solid (using pyrogallol)
950-2000 units/mg solid (using ABTS)

分子量

~44 kDa

溶解性

0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0)
H₂O: soluble

application(s)

diagnostic assay manufacturing

储存温度

2-8°C

安全信息

象形图

GHS08

警示用语：

Danger

危险声明

H317 - H334

预防措施声明

P261 - P272 - P280 - P284 - P302 + P352 - P333 + P313

危险分类

Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1

储存分类代码

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 3

个人防护装备

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)

商品规格

属性名称	属性值
储存温度 Storage temp.	2-8°C冷藏
全球实时库存 Availability √	美国St. Louis ≥ 50 \| 欧洲Eur. ≥ 12 \| 東京Tokyo ≥ 20 \| 香港与北京 ≥ 50

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