脱氧核糖核酸酶I来源于牛胰腺,Deoxyribonuclease I from bovine pancreas [DNase I];lyophilized powder, Protein ≥85 %, ≥400 Kunitz units/mg protein

别名:DNA酶I;脱氧核糖核酸 5′-寡核苷酸-水解酶;脱氧核糖核酸酶I来源于牛胰腺;Deoxyribonucleate 5′-oligonucleotido-hydrolase

CAS号: 9003-98-9 EC 号: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB) EC 号: 232-667-0 MDL编号: MFCD00130918
制造商品牌: 西格玛 Sigma-Aldrich
货号(SKU): DN25
CAS号: 9003-98-9
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说明

一般描述

DNase I(脱氧核糖核酸酶I)是一种从牛胰腺分离的核酸内切酶。
  • 我们的DNase I可将双链和单链DNA酶解成寡核苷酸和单核苷酸。
  • 牛胰腺DNase存在四种异构酶A, B, C和D,均具有不同的等电点:5.22, 4.96, 5.06及4.78.3。主要形式为A,其次为B和C,D所占的比例最小。
  • DNase I结构类似于核酸外切酶III。其中包括两个中央β折叠。每个β折叠由六个β-链组成。这种复杂的β折叠被大量环形和螺旋形区域包围。该酶结构类似于核酸外切酶III。[1]

应用

  • 从原代细胞分离液中去除DNA,在降低粘度的同时提高产量:
  • 将标记碱基掺入DNA:DNA缺口
  • 放射性标记
  • 生物工艺应用:DNA去除
  • 在RT-PCR前从RNA制剂中去除基因组DNA
  • 体外转录
  • 缺口平移
  • DNase足迹
  • 肌动蛋白调控胞内肌动蛋白聚合和细胞凋亡
  • 蛋白质与核酸紫外线交联
  • DNase参与调控胞内肌动蛋白聚合,同时参与细胞凋亡过程 [1]
用于从蛋白质样品中除去 DNA。
 

生化/生理作用

DNase I是一种内切核酸酶,可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg2+存在时,DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn2+存在时,两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。[1]二价阳离子如Mn2+, Ca2+, Co2+以及Zn2+都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca2+可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。最适pH在7-8之间。[2]来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A,B,C和D组成,它们的摩尔比分别为4:1:1。仅发现少量D。[3]2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS)[4]和肌动蛋白[5]都已知可抑制酶的活性。
 

特点和优势

我们的脱氧核糖核酸酶DNAse I基本属于不含RNAse产品,支持该产品应用。
 

单位定义

一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时,在 pH 5.0,37°C的条件下在每mL中每分钟可引起0.001的A260改变。
 

外形

粗制品,含有氯化钙
 

制备说明

溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 °C一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 °C则可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时,它可在60 °C维持活性最长达五小时,并在68 °C <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液((pH 7.2),1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。
 

分析说明

通过缩二脲法测定的蛋白质。
 
 

属性

形式

lyophilized powder

质量水平

300

specific activity

≥400 Kunitz units/mg protein

分子量

~31 kDa

组成

Protein, ≥85%

溶解性

0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, hazy

application(s)

diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing

异质活性

RNase ≤0.02%

运输

wet ice

储存温度

−20°C

 

安全信息

象形图

Health hazard

警示用语:

Danger

危险声明

危险分类

Resp. Sens. 1

储存分类代码

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 3

个人防护装备

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)

商品规格
属性名称属性值
储存温度 Storage temp.-20°C低温冷冻
全球实时库存 Availability √美国St. Louis ≥ 20 | 欧洲Eur. ≥ 16 | 東京Tokyo ≥ 5 | 香港与北京 ≥ 20
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