1、产品简介
Smartarose 4FF 和 Smartaorse 6FF 分别以高度交联的4%和6%琼脂糖微球为基质,拥有良好的物理和层析性能。Smartarose 4FF 和Smartaorse 6FF能适应各种生产操作,且批次间重复性好,因此广泛应用于工业生产。本介质能处理大体积样品,操作简便,并且耐受生物制药生产过程中的温度、pH和化学试剂等常规工作条件。填料可以进行在位清洗,减少生产损失。如果需要,还可以对填料进行灭菌处理。
表1. 产品性能
| Smartarose 4FF | Smartarose 6FF |
基质 | 高度交联的4%琼脂糖微球 | 高度交联的6%琼脂糖微球 |
排阻极限 球蛋白 葡聚糖 | ~3×107 ~6×106 | ~4×106 ~2×106 |
粒径 (μm) | 45-165 | 45-165 |
线性流速 (cm/h) | ≥ 150cm/h | ≥ 250cm/h |
pH 稳定性 | 2-12 | 2-12 |
试剂耐受(40°C ,7天) | 2M NaOH,70% 乙醇, 30% 异丙醇 30% 乙腈, 1% SDS, 2% asepto, 6 M 盐酸胍, 8 M 尿素 |
高压灭菌 | 121℃, 20min |
储存条件 | 含20% 乙醇的1XPBS, 4 -30 °C |
2. 装柱说明
2.1 介质准备
Smartarose 4FF 和 Smartaorse 6FF 已溶胀于20%乙醇。装柱前将20%乙醇抽滤去除。
将75%介质和25%平衡液混匀,真空负压脱气。平衡液不应含有粘性试剂。装柱完成后,可以用粘性缓冲液低流速平衡层析柱。
2.2 介质装填
Smartarose 4FF 和 Smartaorse 6FF被广泛应用于工业纯化,因此,涉及到各种中低压色谱层析柱的填装,下面介绍填装层析柱的方法。
层析柱的装填(使用储液器装填)
用去离子水冲洗层析柱底筛板与接头,确保柱底筛板上无气泡,关闭柱底出口,并在柱
底部留出1-2cm的去离子水。
将树脂悬浮起来,小心的将浆液连续地倒入层析柱中。用玻璃棒沿着柱壁倒入浆液可减
少气泡的产生。
如果使用储液器,应立即在层析柱和储液器中加满水,将进样分配器放置于浆液表面,
连接至泵上,避免在分配器或进样管中产生气泡。
打开层析柱底部出口,开启泵,使其在设定的流速下进行。最初应让缓冲液缓慢流过层
析柱,然后缓慢增加至最终流速,这样可避免液压对所形成柱床的冲击,也可以避免柱床形成的不均匀。如果达不到推荐的压力或流速,可以用你所使用泵的最大流速,这样也可以得到一个很好的装填效果。(注意:在随后的色谱程序中,不要超过最大装柱流速的75%)当柱床高度稳定后,在最后的装柱流速下至少再上3倍柱床体积的去离子水。标上柱床高度。
关闭泵,关闭层析柱出口。
如果使用储液器,去除储液器,将分配器置于层析柱中。
将分配器推向柱子至标记的柱床高度处。允许装柱液进入分配器,锁紧分配器接头。
将装填好的层析柱连接至泵或色谱系统中,开始平衡。如果需要可以重新调整分配器。
2.3 层析柱测试
为了检验层析柱的质量,应进行柱效测试,以确定理论塔板数和峰不对称系数。
洗脱液: 去离子水
样品: 2% (v/v) 丙酮水溶液或者1M NaCl溶液
如图1所示计算理论塔板数,用如下公式:N/m = 5.54 (VR/Wh)2 x 1000/L
计算峰不对称系数(AS)公式如下:AS = b/a (如图1所示)
图1. 柱效检测方法实例
3. 订购信息及相关产品
产品名称 | 货号 | 规格 |
Smartarose 4FF | SEC0101 | 100ml |
SEC0102 | 500ml |
SEC0103 | 1L |
SEC0104 | 10L |
Smartarose 6FF | SEC0111 | 100ml |
SEC0112 | 500ml |
SEC0113 | 1L |
SEC0114 | 10L |