蛋白酶K, 冻干，Proteinase K, Lyophilized；Novagen®

蛋白酶K是从真菌林伯氏白色念球菌中分离出的高活性28,904-Da丝氨酸蛋白酶。该酶对天然和变性蛋白质具有广泛的切割特异性，广泛用于DNA和RNA的纯化。在变性剂如SDS（1%）和高温（50~60°C）存在下，其活性增加。对于蛋白质去除和酶灭活，推荐的工作浓度为50-100 µg/mL，对于组织处理，推荐的工作浓度为2 mg/mL。蛋白酶K冻干粉可制备成20 mg/ml的水溶液，并在-20°C下分装储存。该酶也可作为即用型浓缩储备液（600 mAU/ml），在大多数应用中可方便常规使用。1 mg蛋白酶K相当于30 mAU（AU=Anson单位）。Novagen蛋白酶K产品不含可检测的DNase和RNase.

 

在分离DNA和RNA的过程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道，其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理，暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。

 

蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族，具有活性位点催化三联体(Asp³⁹-His⁶⁹-Ser²²⁴)。它在一系列广泛的环境中均稳定：pH，缓冲盐，去污剂（SDS）以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下，蛋白酶K可保持活性，在不损害分离DNA完整性的前提下，可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。

 

毒性：有害（C）

 

1 AU（AU=Anson单位）定义为在37°C、pH 7.5下每分钟从酪蛋白中释放1.0 µmol（181 µg）酪氨酸的酶量。

 

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