胶原酶I-A来源于溶组织梭菌,Collagenase from Clostridium histolyticum;Type I-A, lyophilized powder, ≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units), 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

别名:梭菌肽酶A,胶原蛋白酶,胶原酶1, Clostridiopeptidase A

CAS号: 9001-12-1 EC 号: 3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB) EC 号: 232-582-9 MDL编号: MFCD00130830 NACRES: NA.75
制造商品牌: 西格玛 Sigma-Aldrich
货号(SKU): C2674
CAS号: 9001-12-1
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说明

一般描述

胶原酶是一种蛋白酶,可切割三螺旋结构的蛋白,即胶原蛋白。组织胶原酶有三种类型,它们属于基质金属蛋白酶(MMP)家族。[1]来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶具有非常强的活性,它在低至4-10℃的温度下可从两端消化胶原蛋白。[2] 粗制胶原酶混合物含有两种主要类型的酶,即胶原酶和梭菌蛋白酶。[3]
 

应用

来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶被用于以下应用:
  • 足细胞分离[4]
  • 用于酶催化法的对比[5]
  • 用于免疫细胞化学的组织制备[6]
  • 睾丸精子提取[7]
  • 制备单细胞悬浮液[8]
  • 免疫荧光法[9]
本品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解离。 已有研究表明,胶原酶也能有效用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质大鼠肝细胞的分离以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于为晚期糖基化终产物研究制备动脉组织。 经测试,用于消化肝细胞的酶浓度约为1 mg/mL。消化浓度范围为0.1至5 mg/mL。
 

生化/生理作用

每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
胶原酶产品是一种由溶组织梭菌( C.histolyticum)分泌的酶的混合物,分泌酶中10-18种化合物成分的相对比例在不同产品中有所差异。 主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶和中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用是细胞从组织有效释放所必需的。 各种类型的胶原蛋白是胶原酶的天然底物。
 

注意

本品在-20°C下可稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下保存30天,其FALGPA或蛋白酶活性没有损失。粗制胶原酶溶液分装品( 10 mg/mL)经快速冷冻可保持稳定,并且可在-20℃下冷冻保存。进一步冻融循环会损坏溶液。 本品在冰上放置7小时,可保留100%活性。
 

单位定义

一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。
 

制备说明

该胶原酶来自溶组织梭菌(Clostridium histolyticum)的培养滤液。培养滤液被认为含有至少7种不同蛋白酶,分子量范围为68-130 kDa。本品为I-A型。其溶液通常使用TESCA缓冲液(含有50 mM TES,0.36 mM氯化钙,在37℃时pH 7.4)制备,浓度为1-2 mg/mL。
 
 

属性

生物来源

Clostridium histolyticum

质量水平

200

类型

Type I-A

形式

lyophilized powder

specific activity

≥125 CDU/mg solid (CDU = collagen digestion units)
0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

分子量

68-130 kDa

浓度

1 mg/mL

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

pH值(酸碱度)

6.3-8.8

运输

dry ice

储存温度

−20°C

 

安全信息

象形图

Health hazard

警示用语:

Danger

危险声明

预防措施声明

危险分类

Resp. Sens. 1

储存分类代码

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

个人防护装备

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

商品规格
属性名称属性值
储存温度 Storage temp.-20°C低温冷冻
全球实时库存 Availability √美国St. Louis ≥ 20 | 欧洲Eur. ≥ 16 | 東京Tokyo ≥ 5 | 香港与北京 ≥ 20
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