组氨酸标签蛋白纯化填料Ni琼脂糖凝胶excel,Ni Sepharose excel histidine-tagged protein purification resin

Ni Sepharose excel是一种用于纯化带组氨酸标签的蛋白的填料,当样本中含有螯合剂时,可将镍离子脱落降至最低,同时最大化蛋白回收率。订货号:17371201;17371202;17371203;17-3712-01;17-3712-02;17-3712-03
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Ni Sepharose excel histidine-tagged protein purification resin

Ni Sepharose excel is a his-tagged protein purification resin for minimized Ni-leakage and maximized protein recovery when samples contain stripping agents.

Ni Sepharose excel 是一种用于纯化带组氨酸标签的蛋白的填料,当样本中含有螯合剂时,可将镍离子脱落降至最低,同时最大化蛋白回收率。

  • 用途广泛 — 适用于昆虫和 CHO 细胞等真核样本以及大肠杆菌等细菌样本。
  • 直接上样 — 可直接上样真核细胞培养上清液,无需预处理通常会引起镍脱落的样本。
  • 保持高达 10 mg/mL 填料的结合载量。
  • 简化样本处理 — 与传统工作流程相比,所需步骤更少。
  • 灵活的规格 — 提供预填充的填料和散装填料,用于优化筛选和带组氨酸标签的蛋白制备级纯化。

用于 IMAC 层析的抗乙二胺四乙酸 (EDTA) 填料

Ni Sepharose excel 是一种 IMAC 填料,预填充有与螯合配基牢固结合的镍离子。即使在 10 mM 乙二胺四乙酸 (EDTA) 中培养 24 小时后,镍离子仍然与配基结合。

基于这种强大的结合能力,可将通常导致金属离子脱落的样本直接装到该填料上,而无需进行费时的预处理。因此,这种用于纯化带组氨酸标签的蛋白的填料特别适用于纯化分泌到真核细胞培养上清液中的带组氨酸标签的蛋白。

大批量样本的带组氨酸标签纯化

Ni Sepharose excel 镍填料具有的流速属性使它非常适合在各种规模下进行纯化。该填料可以处理大量样本,支持手动或自动纯化低浓度的靶蛋白。

成功用于已发表研究

科学家使用 Ni Sepharose excel 从真核和原核样本中纯化带组氨酸标签的重组蛋白质,见如下出版物中的引述:

便捷的预填充柱

Ni Sepharose excel 填料还有以下规格可供选择:

  • HisTrap excel 层析柱:HiTrap 规格,便于与注射器、蠕动泵或层析系统配合使用。
  • His MagSepharose excel:用于小规模纯化和筛选的磁珠。适用于多个并行实验的早期研究阶段。

 

参数Ni Sepharose excel
层析技术带组氨酸标签的蛋白纯化 
结合载量/mL 层析介质 1   至少 10 mg 带组氨酸标签的蛋白 
化学稳定性 20.01 M HCl 和 0.01 M NaOH(一周);10 mM 乙二胺四乙酸 (EDTA)、5 mM DTT、1 M NaOH、5 mM TCEP、20 mM β-巯基乙醇和 6 M 胍-HCl(24 小时);500 mM 咪唑和 100 mM 乙二胺四乙酸 (EDTA)(2 小时);30% 2-丙醇(20 分钟)。 
流速 3150 cm/h~600 cm/h 
许可有关许可信息,请参阅“关于我们”部分中的“许可声明”页。网址:https://www.gelifesciences.com/legal/licensing-statements 
基质高度交联琼脂糖,6% 
金属离子载量54 至 70 μmol Ni2+/ml 培养基 
粒度,d50 V 4~ 90 μm 
储存4 至 30°C,20% 乙醇 
pH 值稳定性 (CIP) 52–14 
pH 稳定性(操作) 62–12 
  • 1采用带 (组氨酸)6-标签的纯蛋白 (M<sub>r</sub> 43000) 浓度为 0.5 mg/mL 的 EX-CELL™ 420 Insect 无血清填料(10% 穿透率下的载量)或带 (组氨酸)6-标签的蛋白 (M<sub>r</sub> 28000) 测试动态结合载量。层析柱体积为 1 mL,流速为 1 mL/min。结合载量取决于样本。
  • 2于室温下在指定溶液中培养介质,然后测量镍脱落量或蛋白结合载量,从而测试化学稳定性。
  • 3室温下的 H2O。 必须优化粘性缓冲液和样本的流速。建议一开始采用低流速。 结合过程中的最佳流速取决于样本。层析柱清洗和洗脱期间,推荐流速为 150 cm/h。CIP 期间的流速不得超过 150 cm/h。
  • 4总体积分布的中值粒径。
  • 5在位清洗:介质可进行在位清洗而功能无显著变化的 pH 值范围。
  • 6填料可在功能无显著变化的情况下调控的 pH 值范围。
商品规格
属性名称属性值
储存温度 Storage temp.常温阴凉避光
全球实时库存 Availability √美国St. Louis ≥ 50 | 欧洲Eur. ≥ 12 | 東京Tokyo ≥ 20 | 香港与北京 ≥ 50