1、产品介绍
Smartdex G-25 系列介质是一类以葡聚糖为基质的凝胶过滤层析(gel filtration chromatography)介质,其工作原理主要是利用具有网状结构的葡聚糖凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。
葡聚糖凝胶是一种具有三维网状结构的高分子化合物,它是由葡聚糖加入交联剂通过醚键互相交联聚合而成的,交联度越大,网孔结构就越紧密,吸水后的体积膨胀就越小,能允许进入凝胶内部的分子的分子量也就越小,反之亦然。层析时,大于凝胶孔径的大分子,被阻于凝胶相外,沿着凝胶颗粒之间的间隙走,下移速度最快,故最先洗脱下来,中分子物质部份进入凝胶内部,洗脱速度为其次,而小分子物质因全部进入凝胶,受到阻力最大,故最后被洗脱下来,如此物质得到分离.
型号G表明每克于凝胶吸水量的多少,例G-25表明每克干凝胶吸水2.5毫升.这表征了凝胶所能膨胀的倍数,亦间接表征了凝胶孔径的大小。
按凝胶介质粒径不同,Smartdex G-25系列介质又可分为三大类,分别为:Smartdex G-25粗,Smartdex G-25中和Smartdex G-25细。详细技术参数见下表:
表1. Smartdex G-25系列介质相关参数
| Smartdex G-25 粗 | Smartdex G-25中 | Smartdex G-25 细 |
颗粒大小 (干) | 60-100目 | 100-200目 | 200-400目 |
分离范围 (葡聚糖) | 1×102-5×103 | 1×102-5×103 | 1×102-5×103 |
分离范围 (球蛋白) | 1×103-5×103 | 1×103-5×103 | 1×103-5×103 |
溶胀因子 (ml/g) | 4-6 | 4-6 | 4-6 |
最大流速 (cm/h) | - | 150 | 60 |
Smartdex G-25系列层析介质常用于蛋白溶液的脱盐,缓冲液交换和不同分子量蛋白的分离等,根据不同的用途其上样量也不可一概而论,样品溶液的缓冲液置换时最高可上样30%柱体积。
2、装柱说明
2.1凝胶的预处理
Smartdex G-25为干粉,初次使用前必须进行预处理。溶胀过程中严禁使用磁力搅拌,以免使微球破碎。
加入足够的水或缓冲液进行溶胀,室温3小时以上或水浴90°C 1h。如果室温溶胀则需要进行真空脱气,然后将溶胀好的微球按照3:1(v/v)加入水或缓冲液搅拌使其形成均匀的75%胶悬液。如果是重复使用的可以将20%乙醇倾去,加水或缓冲液搅拌均匀成75%的胶悬液。
2.2层析柱的装填(使用储液器装填)
用去离子水冲洗层析柱底筛板与接头,确保柱底筛板上无气泡,关闭柱底出口,并在柱底部留出1-2cm的去离子水。
将树脂悬浮起来,小心的将浆液连续地倒入层析柱中。用玻璃棒沿着柱壁倒入浆液可减少气泡的产生。
如果使用储液器,应立即在层析柱和储液器中加满水,将进样分配器放置于浆液表面,连接至泵上,避免在分配器或进样管中产生气泡。
打开层析柱底部出口,开启泵,使其在设定的流速下进行。最初应让缓冲液缓慢流过层析柱,然后缓慢增加至最终流速,这样可避免液压对所形成柱床的冲击,也可以避免柱床形成的不均匀。如果达不到推荐的压力或流速,可以用你所使用泵的最大流速,这样也可以得到一个很好的装填效果。(注意:在随后的色谱程序中,不要超过最大装柱流速的75%)当柱床高度稳定后,在最后的装柱流速下至少再上3倍柱床体积的去离子水。标上柱床高度。
关闭泵,关闭层析柱出口。
如果使用储液器,去除储液器,将分配器置于层析柱中。
将分配器推向柱子至标记的柱床高度处。允许装柱液进入分配器,锁紧分配器接头。
将装填好的层析柱连接至泵或色谱系统中,开始平衡。如果需要可以重新调整分配器。
3、订购信息及相关产品
名称 | 货号 | 规格 |
Smartdex G-25粗 | SEC0011 | 100G |
SEC0015 | 500G |
SEC001C | 1Kg |
Smartdex G-25中 | SEC0031 | 100G |
SEC0035 | 500G |
SEC003C | 1Kg |
Smartdex G-25细 | SEC0051 | 100G |
SEC0055 | 500G |
SEC005C | 1Kg |